测土壤酶样品可以冷冻吗为什么(测土壤酶活性用过多少mm 的土)
教会网
2023-06-19
土壤酶检测的具体方法这里不作介绍,只概括地提出检测时需注意之点。
要想准确测定土壤中积累的酶必须在测定期内,排除微生物新产生酶和对反应产物的同化,要达到此目的,又不影响土壤积累酶的活性,一般对土壤进行高能射线消毒或杀菌剂处理。最常用的杀菌剂是甲苯,但甲苯有它的不足之处,如某些真菌和细菌能利用甲苯作碳源;此外,甲苯不能完全消毒土壤,在某些处理中,也不能完全排除脱氢酶和呼吸酶活性,因而可保留产能和酶合成的潜力;甲苯还可能影响积累酶的活性。土壤用低剂量射线处理也是一种较好的方法,但它也有和甲苯类似的缺点,要减少这些处理所造成的影响,希望使用足够敏感的检测方法,将检测时间降低至几小时以下,几小时内反应保持恒定。
在检测酶时,土壤反应混合物中的底物应保持足够高的浓度。这可能要求底物的始浓度为反应Km值的100倍。除提高底物浓度外,其他检测条件,如温度、湿度也可以不同于自然情况,与反应有关的条件均控制在能表现最大可能的反应效率,但检测温度要低于最适温度,因在这些情况下较高温度明显增加非酶活性。一切物理,化学的反应均予以排除,所以在进行酶活测定时,常设无底物对照及无土壤的对照,从实验样品数据中减去对照样品的数量,以求获得较准确的结果。
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